The ПЛР кількісний ВІН здійснюється в термоциклері ємністю робити падаючи на кожен зразок промінь світла певної довжини хвилі та виявляючи флуоресценцію, випромінювану збудженим флуорохромом.
Можна проводити ПЛР в режимі реального часу використання ДНК і РНК з різних джерел, таких як тканини і мікроорганізми, включаючи периферичну кров, шкіру, волосся, слину і бактерії або віруси.
Кроки ПЛР у реальному часі Першим кроком ПЛР-реакції в реальному часі є перетворення РНК на комплементарну ДНК (кДНК). , процес, відомий як зворотна транскрипція (рис. 1). На наступному етапі використовуються флуоресцентні маркери та реакція ПЛР для ампліфікації та виявлення специфічних генів (рис. 1).
¿Як робити?
- Візьміть зразок крові, слини, слизу або тканини.
- Зразок має власну ДНК і, можливо, ДНК збудника або ракової клітини.
- Зразок ВІН помістити в спеціальну машину. ВІН додає до зразка фермент під назвою полімераза. …
- Процес копіювання ВІН повторіть кілька разів.
ПЛР у реальному часі – це спосіб кінцевої ПЛР, коли накопичення ампліфікованої ДНК виявляється та кількісно визначається в міру прогресування реакції., тобто: «У реальному часі» це досягається шляхом включення флуоресцентної молекули, яка пов’язана з ампліфікованою ДНК, де збільшення цієї флуоресценції…
ПЛР у реальному часі або кількісна ПЛР (q-ПЛР), це інструмент, здатний ампліфікувати та одночасно абсолютно кількісно визначити продукт ДНК завдяки флуоресценції, яка корелює з кількістю.